细菌毒素检测
概述
细菌毒素一般可分为两类,一类为外毒素(exotoxin),是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是革兰阳性菌,如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰阴性菌。另一类为内毒素(endotoxin),主要化学成分是脂多糖中类脂A成分,是革兰阴性菌细胞壁产物,一般不释放,仅在细菌死亡自溶或与其他细胞黏附时,才表现其毒性。细菌毒素检测是指对致病性细菌在生长繁殖过程中产生的外毒素或某些革兰阴性菌细胞裂解后产生的内毒素进行检查和分析的方法。细菌毒素检测有助于判定细菌感染严重程度、进行细菌鉴定、及早预防和发现内毒素休克的发生等。
检查前准备
向被检测者解释本操作的目的、方法等,以消除顾虑;选取患者血液、尿液及脑脊液等进行检测。
操作方法
1.外毒素检测
(1)生物学方法:操作复杂,且不易获得敏感动物,动物的个体差异影响结果判断,只有在发现新毒素的特殊情况下采用。
(2)免疫血清方法:具有快速、灵敏、特异的优点,且可进行大样品量筛选。有沉淀反应、颗粒吸附凝集试验(血凝试验和胶乳凝集试验)、固相放射免疫试验、酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验。
(3)核酸和基因诊断技术:基因探针技术可检查单个菌落产生毒素的性质,通常取病原菌染色体或质粒毒素基因片段制备成探针,利用放射性核素或非放射性生物系统标记,以检查未知标本,不需要培养细菌,操作简单。
(4)自动化检测:仪器原理均根据微生物形态、代谢产物和血清学反应设计,包括细胞颗粒计数仪、光散射测定仪、颜色改变浓度仪、薄层扫描仪和荧光光度计等。
2.内毒素检测
(1)家兔热原试验:是将定量的被检测标本通过耳缘静脉注入家兔内,观察家兔注射后体温变化,判断是否存在内毒素。
(2)鲎试验:是目前检测内毒素最敏感的方法,可检测量微量的脂多糖(LPS)(0.01~1 ug/ ml)。取少量鲎试剂放于两支试管中,加入蒸馏水使之溶解,其中一支试管加入少量标准内毒素,另一支加入蒸馏水进行对照,将上述两支试管轻轻摇匀后,垂直置于37℃温箱中,1h后观察有无凝固,发生凝固者为阳性,不凝固者为阴性。
临床意义
1.外毒素检测
进行细菌鉴定,同时可区分产毒株与非产毒株,如白喉毒素、肉毒毒素的检测等。
2.内毒素检测
内毒素检测灵敏度高,操作简便、快速。内毒素检测主要用于确诊患者是否发生革兰阴性菌感染和内毒素血症,阳性即有临床意义;鲎试验对革兰阴性细菌内毒素以外的物质、革兰阳性细菌、病毒毒素检测均为阴性。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。
目录
概述
检查前准备
操作方法
临床意义