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丙肝病毒基因扩增检测
概述
从患者血清或血浆中提取HCV RNA,在逆转录酶作用下将RNA逆转录为 cDNA,在引物的指导下,以四种脱氧核苷酸为底物,在耐热DNA聚合酶的酶促作用下,对cDNA进行扩增,用Taqman探针法检测扩增产物。通过标准曲线与CT值,即可计算出被检血清中HCV RNA的含量。
实验目的
明确丙肝病毒核酸定量检测的操作规程,指导检验人员正确进行丙肝病毒核酸定量检测的操作,保证检测结果准确可靠。
标本要求
1.标本类型:血清。
2.标本储存和运输:室温运输,采样后尽快送检。室温放置不超过2小时,4℃~8℃不超过72小时,-70℃保存期6个月,应避免反复冻融。
3.标本拒收状态:细菌污染、严重溶血或脂血标本不能作测定。
程序步骤
1.标本采集和运送:用无菌注射器抽取受检者静脉血3~4mL,注入无抗凝剂的采血管内,于室温静置0.5小时,3000rpm离心5分钟,吸取500μL血清(注意勿带入红细胞和纤维蛋白)转入另一无菌1.5mL离心管并标记,即为血清标本。标本可立即用于测试(48小时以内),也可保存于-70℃待测,保存期为6个月。
2.标本及对照标准品的处理:按照实验室使用的试剂说明书操作。
3.PCR扩增及检测:按照实验室使用的试剂说明书操作。
临床意义
为丙型肝炎病毒感染提供诊断依据,并可作为丙型肝炎抗病毒治疗疗效观察依据。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。
目录
概述
实验目的
标本要求
程序步骤
临床意义

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