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淋巴细胞分化抗原检测
概述
淋巴细胞分化抗原检测是指利用特定的单克隆抗体检测淋巴细胞表面分化抗原的方法。淋巴细胞分化抗原参与机体免疫反应或机体免疫记忆的形成,调节机体免疫反应的强弱,淋巴细胞分化抗原检测可以评估免疫功能,对某些免疫性疾病的诊断有重要作用。
检查前准备
向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑;一般选取静脉血进行检测,采血前一天应清淡饮食、晚8点后避免进食和剧烈运动、避免饮酒以免影响结果,采血时避免情绪紧张。
操作方法
1.免疫组织化学染色法
(1)免疫荧光显微技术:使荧光抗体与细胞表面的淋巴细胞分化抗原进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,在荧光显微镜下观察。
(2)免疫金银染色技术:利用胶体金标记淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体,通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置,加入银显影液,用对苯二酚将银离子还原成银原子,被还原的银原子沉积在胶体金颗粒周围形成“银壳”,最终在光镜下就能看到被放大的黑褐色物质。易于辨别阳性物质,而且能检测微量的抗原。
2.流式细胞术
利用荧光素标记的淋巴细胞分化抗原对应的单克隆抗体做分子探针,在流式细胞仪上检测淋巴细胞分化抗原的表达,计数淋巴细胞分化抗原阳性细胞的百分率。
临床意义
1.B淋巴细胞分化抗原
(1)CD5:表达CD5的B细胞可以被各种激活B细胞的试剂激活,在脐带血、成人血和所有主要的外周淋巴样器官中都可以发现。
(2)CD19:主要表达在B细胞上,在成熟的B细胞各个分化阶段上有表达,在定向B细胞的祖细胞上也有表达,但在滤泡树突状细胞上只有弱的表达,因此它是鉴别泛B细胞最好的表面抗原标志。
(3)CD28:在B细胞系列中,浆细胞显著地表达CD28,在骨髓浆细胞和骨髓瘤细胞系中可以发现CD28。
(4)CD20、CD79:与免疫球蛋白有关,只有产生免疫球蛋白的细胞表达这两种CD抗原,因而可用来区分B细胞和浆细胞的不同功能,CD20和CD79阳性时,患有B细胞性淋巴瘤的可能性大。
2.T淋巴细胞分化抗原
(1)CD1:在所有胸腺皮质中的胸腺细胞都可以检测到CD1分子的表达,在激活的单核细胞和朗格汉斯细胞中也表达CD1。
(2)CD2:在T细胞发育的早期阶段表达,由于抗CD2单克隆抗体可以激活早期T淋巴细胞祖细胞,因此CD2抗原可能出现在功能性T细胞受体表达之前,是胸腺细胞激活中可以利用的一种受体。
(3)CD3:在早期胸腺细胞和成熟T细胞中表达,与T淋巴细胞密切联系,这种抗原经常在急性T淋巴细胞白血病中表达。
(4)CD5:在所有的T细胞上都可以发现CD5抗原,它出现在T淋巴细胞个体发育的早期阶段,在外周血和脐带血中B细胞的一些细胞亚群上也可以检测到CD5的存在。
(5)CD7:在T细胞个体发育的非常早期就会有所表达,但在T细胞成熟的最后阶段这一抗原会丢失,CD7的功能还不清楚,单核细胞和NK细胞也表达这种CD7抗原。
(6)CD4和CD8:在抗原激活T细胞时,CD4和CD8作为一种共同的受体,CD4也是人类免疫缺陷病毒的受体。CD4阳性细胞数/CD8阳性细胞数比值降低见于艾滋病、恶性肿瘤等;CD4阳性细胞数/CD8阳性细胞数比值增高见于自身免疫性疾病、变态反应性疾病、器官移植排斥反应等。
(7)CD25:这种抗原表达在激活的T、B淋巴细胞上。
(8)CD28:表达在静止的T细胞上,CD28是环孢菌素抵抗的T细胞表面受体,与信号传导途径有关。
(9)CD45:在所有的造血细胞中都有CD45的表达,缺乏CD45表达的T细胞对各种刺激都不会产生反应。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。
目录
概述
检查前准备
操作方法
临床意义

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