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HLA交叉配型
概述
移植前若受者血清中预先存在细胞毒HLA抗体,移植后则可发生超急性排斥反应,所以必须做HLA交叉配型,检测受者血清中是否含有针对供者淋巴细胞的预存细胞毒抗体。
目的
在移植前检查出不相合的供者,只能移植交叉配型相合的供者器官。
配型前准备
1.供者样品
(1)使用供者新抽取的肝素化全血。
(2)从供者外周全血或淋巴结分离的淋巴细胞,成活率一定要高于80%。
(3)做Ⅰ类抗原交叉配型,可用全血淋巴细胞或T细胞;做Ⅱ类抗原交叉配型,可使用B细胞。
2.患者血清
(1)移植前一个月收集样本,并冰冻保存。对已致敏或最近有抗原刺激,以及病史难以肯定的患者,应在移植前2天内收集血清。
(2)仅有冰冻保存的血清时,应使用对配组淋巴细胞反应最强的血清。
3.标记标准
(1)血样必须各自标记清楚。
(2)未标记试管不可放入标记的容器中。
(3)多个试管不可捆在一起或用一个标签。
(4)分开标记装淋巴结或脾的小瓶。
4.材料与试剂
抗血清试验板、新微滴试验板、血清、石蜡油等。
操作方法
Ⅰ型抗原交叉配型方法:确定患者与供者的ABO血型,保证血型相合;向新微滴试验板中的每个孔加入石蜡油,融化并彻底混匀所有冻存的血清。向微滴试验板第1排的6个孔分别加入对照血清,并稀释所有要交叉配型的血清;向第2排6个孔加入患者血清,向每个孔加入供者淋巴细胞悬液,室温下放置30分钟;向每孔加入兔补体,室温下放置1小时。向每孔加入伊红-Y溶液,放置3分钟;然后再加入38%甲醛溶液,pH7.2~7.4,盖上盖子,使细胞静置沉降30分钟,看结果。
临床意义
可直接判定供者与受者间实际的组织相容性程度。交叉配型为阴性可实施移植,交叉配型为阳性,则不宜进行移植,否则将发生急性或超急性排斥反应。
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。
目录
概述
目的
配型前准备
操作方法
临床意义

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